预防是防止细胞培养过程中发生污染的最好办法。只有预防工作做在前，才能将发生污染的可能性降到最小程度。

　　一般预防可从以下几方面着手：

　　1、添加抗生素

　　2、从物品、用品消毒灭菌着手

　　细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底，各种溶液灭菌除菌要仔细，并在无菌试验阴性后才能使用。操作室及剩余的无菌器材要定期清洁消毒灭菌。

　　3、从操作者做起

　　(1)进无菌室前要用肥皂洗手，按规定穿隔离衣。工作开始要先用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。

　　(2)操作者动作要轻，必须在火焰周围无菌区内打开瓶口，并将瓶口转动烧灼。操作时尽量不要谈话，若打喷嚏或咳嗽应转向背面。

　　(3)操作时要常更换吸管，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去。实验完毕用消毒水浸泡的纱布擦台面。

　　4、防止细胞交叉污染

　　(1)在进行多种细胞培养操作时，所用器具要严格区分。

　　(2)在进行换液或传代操作时，注射器和滴管不要触及细胞培养瓶瓶口，以免把细胞带到培养液中污染其他细胞。

　　(3)细胞一旦购置或从别处引入，均应及早留种冻存，一旦发生污染可重新复苏培养。

　　5、无菌室的彻底消毒

　　(1)0.1%新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室;

　　(2)甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气休对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。

　　(3)细胞培养，首先要避免污染，但在细胞培养过程中，有了污染用适当的方法清除，这样也可以保证细胞培养的成功。