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湿热蕴脾

  实验动物:SD大鼠、昆明小鼠

  模型构建方法:

  ①SD大鼠湿热蕴脾模型:在脾虚证模型基础上,每日灌胃湿热中药煎剂(黄连、黄柏、苍术、薏苡仁按2:2:3:4配伍,浓度1.5g/kg)0.2mL/10g(连续9天),置于湿度80%、温度32℃环境2.5小时/天(连续10天),灌胃高脂糖水(10%蔗糖+5%猪油,0.2mL/10g)每日1次(连续11天);

  ②昆明小鼠湿热蕴脾模型:在脾虚证模型基础上,每日灌胃湿热中药煎剂(同大鼠配方,浓度0.8g/kg)0.1mL/10g(连续8天),置于湿度85%、温度30℃环境2小时/天(连续9天),灌胃高脂糖水(8%蔗糖+4%猪油,0.1mL/10g)每日1次(连续10天);

  成模周期:SD大鼠12-14天/昆明小鼠10-12天

  评价指标:

  ①行为学指标:SD大鼠组身热不扬、口苦口黏、脘腹痞满、大便黏滞不爽(每日排便次数增加4-5倍,粪便黏附笼底)、皮肤油腻、活动量减少70%-75%;昆明小鼠组烦躁不安、毛发油腻打绺、小便短黄、粪便黏腻不成形、体重较对照组低25%-30%、自主活动次数减少65%-70%;

  ②血清学指标:SD大鼠血清胃泌素(GAS)降低40%-45%、淀粉酶(AMY)降低35%-40%、白细胞介素-6(IL-6)升高30%-35%、总胆红素(TBIL)升高25%-30%;昆明小鼠血清胃动素(MTL)降低35%-40%、丙二醛(MDA)升高40%-45%、超氧化物歧化酶(SOD)活性降低30%-35%、甘油三酯(TG)升高20%-25%;

  ③病理形态学:SD大鼠胃黏膜充血糜烂伴黄腻苔样分泌物、肠黏膜红肿增厚、黏液分泌亢进、固有层中性粒细胞浸润明显;昆明小鼠胃黏膜水肿伴渗出物、肠黏膜上皮细胞脱落伴黏液附着、肛周黏膜红肿;

  ④组织指标:SD大鼠胃组织核因子-κB(NF-κB)mRNA表达升高2.2倍、紧密连接蛋白(ZO-1)mRNA表达降低2倍;昆明小鼠肠组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达升高1.8倍、水通道蛋白5(AQP5)mRNA表达升高1.6倍;

  ⑤功能指标:SD大鼠胃排空延迟(排空时间延长50%-55%)、小肠推进率降低40%-45%、糖耐量异常(血糖峰值升高30%-35%)、体力耐力下降(游泳时间缩短60%-65%);昆明小鼠胃排空时间延长45%-50%、小肠推进率降低35%-40%、耐寒能力下降(低温存活时间缩短55%-60%)、水负荷排泄延迟(排尿量减少35%-40%);

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