脾虚证
实验动物:SD大鼠、昆明小鼠
模型构建方法:
①SD大鼠脾虚证模型:每日灌胃大黄水煎液(1.5g/kg)0.2mL/10g(连续7天),同时采用饥饱交替喂养(单日足量喂食,双日禁食)连续10天,束缚应激1.5小时/天(连续8天);
②昆明小鼠脾虚证模型:每日灌胃番泻叶水煎液(0.8g/kg)0.1mL/10g(连续6天),高脂低蛋白饲料喂养(脂肪占比35%,蛋白占比10%)连续9天,强迫游泳10分钟/天(无负重,连续7天);
成模周期:SD大鼠9-11天/昆明小鼠7-9天
评价指标:
①行为学指标:SD大鼠组精神倦怠、毛发枯槁、食欲不振(进食量减少40%-45%)、便溏(粪便稀软不成形)、活动量减少50%-55%;昆明小鼠组嗜睡懒动、体重增长缓慢(较对照组低18%-22%)、腹泻(每日排便次数增加2-3倍)、自主活动次数减少45%-50%;
②血清学指标:SD大鼠血清胃泌素(GAS)降低25%-30%、淀粉酶(AMY)降低20%-25%、白细胞介素-6(IL-6)升高1.8-2倍、总蛋白(TP)降低15%-20%;昆明小鼠血清胃动素(MTL)降低20%-25%、丙二醛(MDA)升高25%-30%、超氧化物歧化酶(SOD)活性降低20%-25%、白蛋白(ALB)降低12%-15%;
③病理形态学:SD大鼠胃黏膜变薄、腺体萎缩、肠绒毛变短变稀疏、黏膜下层轻度水肿;昆明小鼠胃黏膜充血水肿、肠黏膜上皮细胞脱落、固有层炎细胞浸润;
④组织指标:SD大鼠胃组织胃泌素受体(GASR)mRNA表达降低2倍、转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白表达升高1.5倍;昆明小鼠肠组织紧密连接蛋白(ZO-1)mRNA表达降低1.8倍、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)活性升高25%-30%;
⑤功能指标:SD大鼠胃排空延迟(排空时间延长30%-35%)、小肠推进率降低25%-30%、耐寒能力下降(低温存活时间缩短40%-45%);昆明小鼠胃排空时间延长25%-30%、小肠推进率降低20%-25%、体力耐力下降(游泳时间缩短35%-40%);
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