胆郁痰扰
实验动物:SD大鼠、昆明小鼠
模型构建方法:
①SD大鼠胆郁痰扰模型:在脾虚证模型基础上,每日灌胃胆郁痰扰诱导中药煎剂(半夏、陈皮、枳实、竹茹按3:2:2:1配伍,浓度1.9g/kg)0.2mL/10g(连续15天),每日给予束缚刺激(束缚2小时/天,连续17天),同时每日给予高脂饲料喂养(脂肪占比45%,连续17天);
②昆明小鼠胆郁痰扰模型:在脾虚证模型基础上,每日灌胃胆郁痰扰诱导中药煎剂(同大鼠配方,浓度1.2g/kg)0.1mL/10g(连续14天),每日给予束缚刺激(束缚1.5小时/天,连续16天),同时每日给予高脂饲料喂养(脂肪占比40%,连续16天);
成模周期:SD大鼠16-18天/昆明小鼠14-16天
评价指标:
①行为学指标:SD大鼠组烦躁不安(攻击行为频次增加5-6倍)、呼吸道分泌物增多(擦拭口鼻频次增加4-5倍)、失眠(夜间觉醒时间延长60%-65%)、毛发油腻无光泽、旷场实验总活动距离增加55%-60%;昆明小鼠组焦虑(高架十字迷宫开臂探索时间减少60%-65%)、皮毛油腻易粘连、攀爬能力下降(攀爬网格时间延长70%-75%)、夜间活动量增加55%-60%、舔舐口鼻频次增加3-4倍;
②血清学指标:SD大鼠血清总胆固醇(TC)升高35%-40%、甘油三酯(TG)升高30%-35%、多巴胺(DA)升高40%-45%、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)升高25%-30%、血清白蛋白(ALB)降低20%-25%;昆明小鼠血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)升高30%-35%、皮质酮(CORT)升高45%-50%、5-羟色胺(5-HT)降低2.0倍、谷草转氨酶(AST)升高25%-30%、超氧化物歧化酶(SOD)活性降低25%-30%;
③病理形态学:SD大鼠胆囊扩张伴胆汁淤积、肝脏轻度脂肪变性、肺间质轻度水肿、胃黏膜充血伴黏液增多、肠黏膜皱襞水肿;昆明小鼠胆囊轻度肿大、肝窦扩张、肺组织轻度炎症细胞浸润、胃黏膜上皮细胞变性、肠黏膜黏液分泌增多;
④组织指标:SD大鼠肝组织脂蛋白脂肪酶(LPL)活性降低2.1倍、脑内多巴胺(DA)含量升高2.0倍;昆明小鼠肝组织脂肪合成酶(FAS)mRNA表达升高1.9倍、脑海马区γ-氨基丁酸(GABA)含量降低1.8倍;
⑤功能指标:SD大鼠胃排空延迟(排空时间延长60%-65%)、小肠推进率降低50%-55%、气道阻力增加45%-50%(肺功能检测)、水迷宫实验逃避潜伏期延长70%-75%;昆明小鼠胃排空时间延长55%-60%、小肠推进率降低45%-50%、体力耐力下降(游泳时间缩短70%-75%)、水负荷排泄延迟(排尿量减少40%-45%);
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