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肝风内动

  实验动物:SD大鼠、昆明小鼠

  模型构建方法:

  ①SD大鼠肝风内动模型:在脾虚证模型基础上,每日灌胃肝风内动诱导中药煎剂(羚羊角、钩藤、石决明按3:2:2配伍,浓度1.8g/kg)0.2mL/10g(连续15天),置于高频震动平台(20Hz,每次10分钟,每日3次,连续17天),同时每日给予突发声光刺激(强光闪烁+100dB噪音,每次15分钟,每日4次,连续17天);

  ②昆明小鼠肝风内动模型:在脾虚证模型基础上,每日灌胃肝风内动诱导中药煎剂(同大鼠配方,浓度1.1g/kg)0.1mL/10g(连续14天),置于中频震动平台(15Hz,每次8分钟,每日3次,连续16天),同时每日给予突发声光刺激(强光闪烁+95dB噪音,每次12分钟,每日4次,连续16天);

  成模周期:SD大鼠16-18天/昆明小鼠14-16天

  评价指标:

  ①行为学指标:SD大鼠组肢体震颤(震颤频次增加5-6倍)、行走步态不稳(旷场实验步态异常率达85%以上)、平衡能力显著下降(平衡木实验停留时间缩短65%-70%)、急躁易怒(攻击笼具频次增加6-7倍)、夜间活动量增加55%-60%;昆明小鼠组肢体抽搐(抽搐频次增加4-5倍)、转棒实验掉落时间缩短60%-65%、烦躁不安(高架十字迷宫闭臂停留时间增加70%-75%)、皮毛竖立无光泽、自主活动夜间频次增加50%-55%;

  ②血清学指标:SD大鼠血清钙(Ca²+)降低30%-35%、谷氨酸(Glu)含量升高2.5倍、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)升高30%-35%、超氧化物歧化酶(SOD)活性降低30%-35%、血清镁(Mg²+)降低25%-30%;昆明小鼠血清皮质酮(CORT)升高55%-60%、γ-氨基丁酸(GABA)含量降低2.0倍、丙二醛(MDA)含量升高40%-45%、谷草转氨酶(AST)升高25%-30%、血清钾(K+)降低20%-25%;

  ③病理形态学:SD大鼠肝脏充血肿大伴小叶间静脉扩张、脑内小血管痉挛、肾间质轻度水肿、胃黏膜充血糜烂、肠黏膜皱襞充血;昆明小鼠肝脏轻度脂肪变性、脑皮层神经元轻度变性、脾组织轻度充血、胃黏膜水肿伴点状出血、肠黏膜上皮细胞变性;

  ④组织指标:SD大鼠肝组织Ca²+-ATP酶活性降低2.3倍、脑内谷氨酸(Glu)含量升高2.2倍;昆明小鼠肝组织核因子-κB(NF-κB)mRNA表达升高1.9倍、脑海马区脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA表达降低1.8倍;

  ⑤功能指标:SD大鼠胃排空延迟(排空时间延长60%-65%)、小肠推进率降低50%-55%、强迫游泳实验不动时间减少65%-70%、水迷宫实验逃避潜伏期延长75%-80%;昆明小鼠胃排空时间延长55%-60%、小肠推进率降低45%-50%、体力耐力显著下降(游泳时间缩短75%-80%)、水负荷排泄延迟(排尿量减少40%-45%);

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