肝阴虚
实验动物:SD大鼠、昆明小鼠
模型构建方法:
①SD大鼠肝阴虚模型:在脾虚证模型基础上,每日灌胃肝阴虚诱导中药煎剂(黄柏、知母、丹皮按3:2:2配伍,浓度1.7g/kg)0.2mL/10g(连续14天),置于低湿度环境(相对湿度30%-35%)中饲养,同时每日给予轻度电刺激(1mA,每次5分钟,每日3次,连续16天);
②昆明小鼠肝阴虚模型:在脾虚证模型基础上,每日灌胃肝阴虚诱导中药煎剂(同大鼠配方,浓度1.0g/kg)0.1mL/10g(连续13天),置于低湿度环境(相对湿度35%-40%)中饲养,同时每日给予强迫运动刺激(跑轮运动30分钟/天,连续15天);
成模周期:SD大鼠15-17天/昆明小鼠13-15天
评价指标:
①行为学指标:SD大鼠组口干咽燥(舔水频次增加4-5倍)、五心烦热(扎堆行为减少60%-65%)、失眠少寐(昼夜活动颠倒,夜间觉醒时间增加50%-55%)、毛发干枯易断、旷场实验中央区域停留时间减少45%-50%;昆明小鼠组烦躁不安(高架十字迷宫开臂探索时间减少55%-60%)、皮毛无光泽且易脱落、体重较对照组低35%-40%、自主活动夜间频次增加45%-50%、舔舐口唇频次增加3倍;
②血清学指标:SD大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)升高20%-25%、谷草转氨酶(AST)升高18%-23%、血清总胆红素(TBIL)升高25%-30%、皮质醇(COR)升高30%-35%、超氧化物歧化酶(SOD)活性降低25%-30%;昆明小鼠血清皮质酮(CORT)升高40%-45%、去甲肾上腺素(NE)升高30%-35%、谷草转氨酶(AST)升高20%-25%、血清白蛋白(ALB)降低20%-25%、丙二醛(MDA)含量升高30%-35%;
③病理形态学:SD大鼠肝脏体积略缩小伴颜色暗红、肝窦扩张、肾间质轻度充血、胃黏膜干燥无光泽、肠黏膜皱襞减少;昆明小鼠肝脏轻度萎缩伴脂肪变性、脑皮层血管轻度扩张、脾组织轻度充血、肠黏膜上皮细胞变性;
④组织指标:SD大鼠肝组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性降低2.2倍、脑内5-羟色胺(5-HT)含量降低1.9倍;昆明小鼠肝组织核因子-κB(NF-κB)mRNA表达升高1.8倍、脑海马区脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA表达降低1.7倍;
⑤功能指标:SD大鼠胃排空延迟(排空时间延长55%-60%)、小肠推进率降低45%-50%、强迫游泳实验不动时间增加65%-70%、水迷宫实验逃避潜伏期延长70%-75%;昆明小鼠胃排空时间延长50%-55%、小肠推进率降低40%-45%、体力耐力下降(游泳时间缩短70%-75%)、水负荷排泄延迟(排尿量减少35%-40%);
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