肾不纳气

　　实验动物：SD大鼠、昆明小鼠

　　模型构建方法：

　　①SD大鼠肾不纳气模型：在脾虚证模型基础上，每日灌胃肾不纳气诱导中药煎剂(苏子、莱菔子、沉香按3:2:1配伍，浓度1.6g/kg)0.2mL/10g(连续15天)，每日给予缺氧刺激(置于10%-12%氧浓度环境，每日暴露3小时，连续17天)，同时每日给予轻度运动刺激(treadmill跑步15分钟/天，连续17天);

　　②昆明小鼠肾不纳气模型：在脾虚证模型基础上，每日灌胃肾不纳气诱导中药煎剂(同大鼠配方，浓度0.9g/kg)0.1mL/10g(连续14天)，每日给予缺氧刺激(置于11%-13%氧浓度环境，每日暴露2小时，连续16天)，同时每日给予轻度运动刺激(转轮运动10分钟/天，连续16天);

　　成模周期：SD大鼠16-18天/昆明小鼠14-16天

　　评价指标：

　　①行为学指标：SD大鼠组呼吸急促(安静时呼吸频率增加55%-60%)、活动后喘息(游泳后喘息持续时间延长65%-70%)、精神倦怠(自主活动频次减少70%-75%)、毛发稀疏无光泽(脱毛率达55%以上)、食欲减退(摄食量减少45%-50%);昆明小鼠组呼吸浅快(安静时呼吸频率增加50%-55%)、攀爬能力下降(攀爬网格时间延长60%-65%)、反应迟钝(对声音刺激响应时间延长65%-70%)、体重较对照组低35%-40%、皮毛枯槁易断;

　　②血清学指标：SD大鼠血清内皮素-1(ET-1)升高30%-35%、一氧化氮(NO)降低25%-30%、血肌酐(Scr)升高25%-30%、尿素氮(BUN)升高20%-25%、超氧化物歧化酶(SOD)活性降低30%-35%;昆明小鼠血清白介素-6(IL-6)升高35%-40%、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)升高30%-35%、皮质酮(CORT)升高25%-30%、血清白蛋白(ALB)降低20%-25%、谷草转氨酶(AST)升高15%-20%;

　　③病理形态学：SD大鼠肾脏体积略小伴皮质变薄、肺组织轻度充血、支气管黏膜增厚、脾组织轻度萎缩、胃黏膜苍白无光泽;昆明小鼠肾脏轻度纤维化、肺组织肺泡扩张、脑内小血管收缩、肠黏膜变薄、膀胱黏膜轻度充血;

　　④组织指标：SD大鼠肾组织缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA表达升高1.9倍、肺组织血管紧张素转换酶2(ACE2)mRNA表达降低1.8倍;昆明小鼠肾组织血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达降低1.7倍、肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA表达升高1.6倍;

　　⑤功能指标：SD大鼠体力耐力显著下降(游泳时间缩短75%-80%)、呼吸功能下降(分钟通气量减少40%-45%)、水迷宫实验逃避潜伏期延长70%-75%、胃排空延迟(排空时间延长60%-65%)、尿量增加(24小时尿量增加50%-55%);昆明小鼠体力耐力下降(游泳时间缩短70%-75%)、呼吸频率增加(运动后呼吸频率升高55%-60%)、被动回避实验错误次数增加60%-65%、小肠推进率降低45%-50%、尿蛋白排泄增加(尿蛋白含量升高40%-45%);