肾气不固

　　实验动物：SD大鼠、昆明小鼠

　　模型构建方法：

　　①SD大鼠肾气不固模型：在脾虚证模型基础上，每日灌胃肾气不固诱导中药煎剂(茯苓、泽泻、猪苓按3:2:2配伍，浓度1.5g/kg)0.2mL/10g(连续15天)，每日给予过度饮水刺激(自由饮水基础上额外灌胃10mL/100g体重，连续17天)，同时每日给予轻度应激刺激(噪音刺激30分钟/天，连续17天);

　　②昆明小鼠肾气不固模型：在脾虚证模型基础上，每日灌胃肾气不固诱导中药煎剂(同大鼠配方，浓度0.8g/kg)0.1mL/10g(连续14天)，每日给予过度饮水刺激(自由饮水基础上额外灌胃5mL/100g体重，连续16天)，同时每日给予轻度应激刺激(震动刺激20分钟/天，连续16天);

　　成模周期：SD大鼠16-18天/昆明小鼠14-16天

　　评价指标：

　　①行为学指标：SD大鼠组尿频尿急(排尿次数增加60%-65%)、遗尿(笼底湿斑面积增加70%-75%)、精神不振(自主活动频次减少65%-70%)、腰膝酸软(站立时间缩短60%-65%)、食欲减退(摄食量减少40%-45%);昆明小鼠组小便频数(排尿次数增加55%-60%)、尿液清长(尿比重降低15%-20%)、反应迟钝(对刺激响应时间延长60%-65%)、体重增长缓慢(较对照组低35%-40%)、皮毛干枯(脱毛率达50%以上);

　　②血清学指标：SD大鼠血清抗利尿激素(ADH)降低30%-35%、醛固酮(ALD)降低25%-30%、血肌酐(Scr)升高20%-25%、尿素氮(BUN)升高15%-20%、超氧化物歧化酶(SOD)活性降低25%-30%;昆明小鼠血清抗利尿激素(ADH)降低25%-30%、醛固酮(ALD)降低20%-25%、皮质酮(CORT)升高20%-25%、谷草转氨酶(AST)升高15%-20%、血清白蛋白(ALB)降低20%-25%;

　　③病理形态学：SD大鼠肾脏体积略大伴肾盂轻度扩张、肾小管上皮细胞水肿、膀胱壁变薄、前列腺轻度增生、脾组织轻度充血;昆明小鼠肾脏轻度水肿、膀胱黏膜充血、卵巢组织轻度萎缩、胃黏膜苍白、肠黏膜皱襞减少;

　　④组织指标：SD大鼠肾组织水通道蛋白2(AQP2)mRNA表达降低2.2倍、膀胱组织逼尿肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA表达降低1.9倍;昆明小鼠肾组织水通道蛋白4(AQP4)mRNA表达降低1.8倍、卵巢组织FSH受体(FSHR)mRNA表达降低1.7倍;

　　⑤功能指标：SD大鼠尿量增加(24小时尿量增加60%-65%)、尿蛋白排泄增加(尿蛋白含量升高50%-55%)、体力耐力下降(游泳时间缩短70%-75%)、胃排空延迟(排空时间延长55%-60%)、水迷宫实验逃避潜伏期延长65%-70%;昆明小鼠尿量增加(24小时尿量增加55%-60%)、尿糖排泄增加(尿糖含量升高45%-50%)、体力耐力下降(游泳时间缩短65%-70%)、小肠推进率降低45%-50%、被动回避实验错误次数增加55%-60%;