肾精不足

　　实验动物：SD大鼠、昆明小鼠

　　模型构建方法：

　　①SD大鼠肾精不足模型：在脾虚证模型基础上，每日灌胃肾精不足诱导中药煎剂(熟地、女贞子、墨旱莲按3:2:2配伍，浓度1.6g/kg)0.2mL/10g(连续15天)，每日给予负重游泳刺激(负重10%体重，游泳20分钟/天，连续17天)，同时每日给予夜间间断光照(每2小时开灯1小时，连续17天);

　　②昆明小鼠肾精不足模型：在脾虚证模型基础上，每日灌胃肾精不足诱导中药煎剂(同大鼠配方，浓度0.9g/kg)0.1mL/10g(连续14天)，每日给予负重游泳刺激(负重8%体重，游泳15分钟/天，连续16天)，同时每日给予夜间间断光照(每1.5小时开灯30分钟，连续16天);

　　成模周期：SD大鼠16-18天/昆明小鼠14-16天

　　评价指标：

　　①行为学指标：SD大鼠组腰膝酸软(攀爬网格时间延长75%-80%)、精神倦怠(自主活动频次减少70%-75%)、毛发稀疏脱落(脱毛率达65%以上)、记忆力减退(水迷宫预实验错误次数增加60%-65%)、性欲减退(交配行为频次减少50%-55%);昆明小鼠组反应迟缓(对声音刺激响应时间延长65%-70%)、体重增长缓慢(较对照组低45%-50%)、皮毛无光泽易断、自主活动减少(日间活动频次减少60%-65%)、探索行为降低(旷场实验中央区域停留时间减少55%-60%);

　　②血清学指标：SD大鼠血清促卵泡生成素(FSH)升高35%-40%、促黄体生成素(LH)升高30%-35%、睾酮(T)降低25%-30%、血肌酐(Scr)升高30%-35%、尿素氮(BUN)升高25%-30%;昆明小鼠血清雌二醇(E2)降低30%-35%、睾酮(T)降低25%-30%、皮质酮(CORT)升高20%-25%、谷草转氨酶(AST)升高25%-30%、超氧化物歧化酶(SOD)活性降低35%-40%;

　　③病理形态学：SD大鼠肾脏体积略小伴皮质变薄、肾小管萎缩、睾丸组织生精细胞减少、肝组织轻度脂肪变性、脾组织轻度萎缩;昆明小鼠肾脏轻度纤维化、卵巢组织卵泡发育不良、脑内海马区神经元轻度减少、胃黏膜苍白、肠黏膜皱襞变平;

　　④组织指标：SD大鼠肾组织Bcl-2 mRNA表达降低2.0倍、睾丸组织Stra8 mRNA表达降低1.9倍;昆明小鼠肾组织Bax mRNA表达升高1.8倍、卵巢组织CYP19A1 mRNA表达降低1.7倍;

　　⑤功能指标：SD大鼠体力耐力显著下降(游泳时间缩短80%-85%)、记忆力下降(水迷宫实验逃避潜伏期延长75%-80%)、精子活力降低(精子活动率减少50%-55%)、胃排空延迟(排空时间延长65%-70%);昆明小鼠体力耐力下降(游泳时间缩短75%-80%)、学习能力降低(被动回避实验错误次数增加60%-65%)、排卵数减少(较对照组低45%-50%)、小肠推进率降低50%-55%;