脾肾阳虚

　　实验动物：SD大鼠、昆明小鼠

　　模型构建方法：

　　①SD大鼠脾肾阳虚模型：在脾虚证模型基础上，每日灌胃脾肾阳虚诱导中药煎剂(附子、肉桂、干姜、白术按1:1:2:3配伍，浓度1.5g/kg)0.2mL/10g(连续15天)，每日给予低温应激(置于4±1℃环境1小时/天，连续17天)，同时每日限制进食量(给予正常食量的60%，连续17天);

　　②昆明小鼠脾肾阳虚模型：在脾虚证模型基础上，每日灌胃脾肾阳虚诱导中药煎剂(同大鼠配方，浓度0.8g/kg)0.1mL/10g(连续14天)，每日给予低温应激(置于6±1℃环境45分钟/天，连续16天)，同时每日限制进食量(给予正常食量的55%，连续16天);

　　成模周期：SD大鼠16-18天/昆明小鼠14-16天

　　评价指标：

　　①行为学指标：SD大鼠组畏寒蜷缩(低温环境下蜷缩时间增加75%-80%)、精神萎靡(自主活动频次减少70%-75%)、腰膝冷痛(站立时间缩短65%-70%)、大便溏薄(粪便不成形率达80%以上)、体重显著下降(较对照组低45%-50%);昆明小鼠组畏寒喜暖(趋向热源时间缩短60%-65%)、反应迟缓(对刺激响应时间延长70%-75%)、皮毛无光泽(脱毛率达60%以上)、尿量增多(排尿次数增加55%-60%)、食欲极差(摄食量减少50%-55%);

　　②血清学指标：SD大鼠血清甲状腺素(T3)降低35%-40%、甲状腺素(T4)降低30%-35%、皮质醇(COR)降低25%-30%、血肌酐(Scr)升高20%-25%、超氧化物歧化酶(SOD)活性降低30%-35%;昆明小鼠血清甲状腺素(T3)降低30%-35%、皮质酮(CORT)降低25%-30%、白介素-1β(IL-1β)升高20%-25%、尿素氮(BUN)升高15%-20%、血清白蛋白(ALB)降低20%-25%;

　　③病理形态学：SD大鼠肾脏萎缩伴间质纤维化、脾脏肿大伴淤血、胃黏膜苍白、肠黏膜变薄、肝脏脂肪变性;昆明小鼠肾脏轻度萎缩、脾脏滤泡萎缩、胃黏膜糜烂、肠绒毛稀疏、卵巢组织萎缩;

　　④组织指标：SD大鼠肾组织TGF-β1 mRNA表达升高2.2倍、脾组织Bcl-2 mRNA表达降低1.9倍;昆明小鼠肾组织AQP2 mRNA表达降低1.8倍、卵巢组织ERα mRNA表达降低1.7倍;

　　⑤功能指标：SD大鼠体力耐力严重下降(游泳时间缩短80%-85%)、水迷宫实验逃避潜伏期延长75%-80%、胃排空延迟(排空时间延长65%-70%)、24小时尿量增加65%-70%、血清淀粉酶活性降低35%-40%;昆明小鼠体力耐力下降(游泳时间缩短75%-80%)、被动回避实验错误次数增加65%-70%、小肠推进率降低55%-60%、24小时尿量增加60%-65%、糖水偏好度降低40%-45%;