肝郁脾虚

　　实验动物：SD大鼠、昆明小鼠

　　模型构建方法：

　　①SD大鼠肝郁脾虚模型：在脾虚证模型基础上，每日灌胃肝郁脾虚诱导中药煎剂(柴胡、香附、枳壳、白术按2:2:1:3配伍，浓度1.4g/kg)0.2mL/10g(连续15天)，每日给予束缚应激刺激(束缚于固定器中30分钟/天，连续17天)，同时每日给予慢性情绪应激(随机噪音+灯光交替刺激20分钟/天，连续17天);

　　②昆明小鼠肝郁脾虚模型：在脾虚证模型基础上，每日灌胃肝郁脾虚诱导中药煎剂(同大鼠配方，浓度0.7g/kg)0.1mL/10g(连续14天)，每日给予束缚应激刺激(束缚于离心管中20分钟/天，连续16天)，同时每日给予社交隔离应激(单笼饲养+随机气味刺激15分钟/天，连续16天);

　　成模周期：SD大鼠16-18天/昆明小鼠14-16天

　　评价指标：

　　①行为学指标：SD大鼠组情绪烦躁(攻击行为频次增加65%-70%)、胸胁胀满(拱背频次增加55%-60%)、食欲减退(摄食量减少50%-55%)、大便稀溏(粪便含水量升高45%-50%)、自主活动紊乱(活动频次波动幅度达60%以上);昆明小鼠组焦虑样行为(旷场实验中央区停留时间减少70%-75%)、毛发竖立(竖毛率达60%以上)、体重增长停滞(较对照组低40%-45%)、腹泻(排便次数增加60%-65%)、对新环境探索减少(探索时间缩短55%-60%);

　　②血清学指标：SD大鼠血清皮质酮(CORT)升高35%-40%、5-羟色胺(5-HT)降低30%-35%、多巴胺(DA)降低25%-30%、谷丙转氨酶(ALT)升高20%-25%、血清总蛋白(TP)降低20%-25%;昆明小鼠血清皮质酮(CORT)升高30%-35%、去甲肾上腺素(NE)升高25%-30%、白介素-6(IL-6)升高20%-25%、谷草转氨酶(AST)升高15%-20%、血清白蛋白(ALB)降低15%-20%;

　　③病理形态学：SD大鼠肝脏轻度淤血伴肝细胞水肿、脾脏轻度肿大、胃黏膜糜烂、肠黏膜充血水肿、胸腺萎缩;昆明小鼠肝脏脂肪变性、脾脏滤泡减少、胃黏膜变薄、肠绒毛缩短、脑内海马区神经元轻度变性;

　　④组织指标：SD大鼠肝组织c-fos mRNA表达升高2.3倍、脾组织IL-10 mRNA表达降低1.8倍;昆明小鼠脑内海马区BDNF mRNA表达降低1.9倍、肠组织ZO-1 mRNA表达降低1.7倍;

　　⑤功能指标：SD大鼠水迷宫实验逃避潜伏期延长75%-80%、胃排空延迟(排空时间延长60%-65%)、小肠推进率降低55%-60%、体力耐力下降(游泳时间缩短70%-75%)、血清淀粉酶活性降低30%-35%;昆明小鼠被动回避实验错误次数增加65%-70%、小肠推进率降低50%-55%、体力耐力下降(游泳时间缩短65%-70%)、粪便含水量升高45%-50%、糖水偏好度降低35%-40%;