皮肤创伤、烧伤

　　实验动物：SD大鼠、昆明小鼠

　　模型构建方法：

　　①SD大鼠皮肤创伤模型：采用全层切割法诱导。大鼠麻醉后背部剃毛消毒，用手术刀沿背部中线做1.5cm×1.0cm全层皮肤缺损(深达筋膜层)，创面暴露不缝合，术后每日用生理盐水清洁创面，观察渗液及愈合情况;SD大鼠深Ⅱ度烧伤模型：背部剃毛后，将80℃恒温水浴锅加热的铜片(直径1.5cm)接触皮肤15秒，造成深Ⅱ度烧伤创面(面积约占体表面积10%)，术后涂抹磺胺嘧啶银软膏预防感染。

　　②昆明小鼠皮肤创伤模型：采用打孔法制备。小鼠麻醉后背部剃毛，用直径0.8cm的皮肤打孔器取全层皮肤缺损，创面暴露，每日观察伤口收缩情况;昆明小鼠浅Ⅱ度烧伤模型：背部剃毛后，用75℃热水浸泡10秒，造成浅Ⅱ度烧伤(面积约占体表面积8%)，术后每日用碘伏消毒创面。

　　成模周期：SD大鼠皮肤创伤模型5-7天/烧伤模型7-10天;昆明小鼠皮肤创伤模型3-5天/烧伤模型5-8天

　　评价指标：

　　①行为学指标：SD大鼠创伤组舔舐创面次数增加(每日30-40次)、活动量减少(旷场实验总路程降低45%-50%)、体重增长缓慢(较对照组低20%-25%);烧伤组疼痛反应增强(缩爪反射次数增加50%-55%)、摄食量减少30%-35%、攀爬能力下降(攀爬高度减少40%-45%);昆明小鼠创伤组自主活动次数减少40%-45%、伤口触痛反应明显(缩身次数增加50%-55%);烧伤组转棒实验掉落时间缩短35%-40%、蜷缩时间增加45%-50%。

　　②血清学指标：SD大鼠创伤组血清转化生长因子β1(TGF-β1)升高2.5-3.0倍、白细胞介素-6(IL-6)升高2.2-2.6倍、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)升高2.0-2.4倍;烧伤组血清IL-1β升高2.8-3.2倍、皮质醇升高1.8-2.2倍、C反应蛋白(CRP)升高3.0-3.5倍;昆明小鼠创伤组TGF-β1升高2.0-2.4倍、IL-6升高1.8-2.2倍;烧伤组IL-1β升高2.3-2.7倍、CRP升高2.5-3.0倍。

　　③病理形态学：SD大鼠创伤组创面肉芽组织增生不足(厚度较对照组低30%-35%)、上皮再生延迟(7天时上皮覆盖率仅30%-35%)、少量炎症细胞浸润;烧伤组皮肤坏死层增厚(达200-250μm)、真皮层血管扩张充血、大量中性粒细胞浸润;昆明小鼠创伤组创面纤维组织填充缓慢、上皮迁移受阻;烧伤组表皮水疱形成、真皮层胶原纤维变性、炎症细胞聚集。

　　④组织指标：SD大鼠创伤组创面组织Ⅰ型胶原α1链(COL1A1)mRNA表达升高2.3倍、TGF-β1 mRNA升高2.1倍、基质金属蛋白酶2(MMP2)mRNA升高2.5倍;烧伤组热休克蛋白70(HSP70)mRNA升高2.8倍、MMP9 mRNA升高2.4倍、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA升高2.2倍;昆明小鼠创伤组COL1A1 mRNA升高1.9倍、TGF-β1 mRNA升高1.7倍;烧伤组HSP70 mRNA升高2.3倍、VEGF mRNA升高1.9倍。

　　⑤功能指标：SD大鼠创伤组创面愈合时间延长50%-55%(对照组7天愈合，模型组10-11天)、皮肤张力降低40%-45%;烧伤组创面愈合率降低35%-40%(7天时愈合率仅25%-30%)、皮肤弹性恢复延迟(14天时弹性仅为正常的60%-65%);昆明小鼠创伤组愈合时间延长45%-50%、皮肤抗拉力下降35%-40%;烧伤组愈合率降低30%-35%、瘢痕形成率达80%以上。