骨折、骨缺损

　　实验动物：SD大鼠、昆明小鼠

　　模型构建方法：

　　①SD大鼠闭合性股骨骨折模型：采用三点弯曲法诱导。大鼠麻醉后仰卧固定，右后肢股骨中段放置于两点支撑台上，上方施加压力至股骨骨折，骨折端对齐后用克氏针髓内固定，术后每日观察肢体肿胀及活动情况，自由摄食饮水。

　　②昆明小鼠颅骨临界性骨缺损模型：采用钻孔法制备。小鼠麻醉后俯卧固定，头部消毒，于顶骨中线旁开1mm处钻取直径2mm的圆形骨缺损，术后局部涂抹抗生素软膏，每日观察伤口愈合情况。

　　成模周期：SD大鼠4-6周/昆明小鼠3-5周

　　评价指标：

　　①行为学指标：SD大鼠组右后肢负重能力下降(足底压力减少50%-55%)、活动量减少(旷场实验总路程降低45%-50%)、攀爬能力降低(攀爬高度减少40%-45%)、体重增长缓慢(较对照组低20%-25%);昆明小鼠组头部触痛反应增强(缩头次数增加50%-55%)、自主活动次数减少40%-45%、转棒实验掉落时间缩短35%-40%、摄食量减少15%-20%;

　　②血清学指标：SD大鼠血清碱性磷酸酶(ALP)升高2.5-3.0倍、骨钙素(OC)升高2.2-2.6倍、Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)升高2.0-2.4倍、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)升高35%-40%;昆明小鼠血清ALP升高2.0-2.4倍、OC升高1.8-2.2倍、CTX-Ⅰ升高1.9-2.3倍、TNF-α升高30%-35%;

　　③病理形态学：SD大鼠股骨骨折端骨痂形成量少(骨痂体积较对照组低40%-45%)、骨折线模糊延迟(6周时仍可见清晰骨折线率达70%以上)、骨小梁排列紊乱;昆明小鼠颅骨缺损区新生骨面积少(仅占缺损面积25%-30%)、成骨细胞数量减少、纤维组织填充为主;

　　④组织指标：SD大鼠股骨骨折端骨形态发生蛋白-2(BMP-2)mRNA表达升高2.3倍、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达升高2.1倍、Ⅰ型胶原α1链(COL1A1)mRNA表达升高2.5倍;昆明小鼠颅骨缺损区BMP-2 mRNA升高1.9倍、VEGF mRNA升高1.7倍、COL1A1 mRNA升高2.2倍;

　　⑤功能指标：SD大鼠股骨三点弯曲试验最大载荷下降40%-45%、骨密度(BMD)降低35%-40%、步态周期延长30%-35%;昆明小鼠颅骨缺损区骨密度降低30%-35%、抗压强度下降25%-30%、被动回避实验错误次数增加40%-45%;