骨关节炎OA

　　实验动物：SD大鼠、昆明小鼠

　　模型构建方法：

　　①SD大鼠骨关节炎模型：采用内侧半月板不稳定联合前交叉韧带切断法。大鼠麻醉后仰卧固定，消毒膝关节区域，切开皮肤暴露关节腔，切除内侧半月板并切断前交叉韧带，逐层缝合切口，术后每日肌注青霉素钠(10万U/kg)预防感染，自由摄食饮水，定期观察关节肿胀及活动情况。

　　②昆明小鼠骨关节炎模型：采用关节腔内注射木瓜蛋白酶诱导法。小鼠麻醉后固定，膝关节腔注射4%木瓜蛋白酶溶液(5μL/只)，每周1次，连续3周，期间每日观察小鼠步态及关节活动度变化。

　　成模周期：SD大鼠6-8周/昆明小鼠4-6周

　　评价指标：

　　①行为学指标：SD大鼠组旷场实验总路程减少45%-50%、关节屈曲角度降低30%-35%、跛行率达80%以上、体重增长缓慢(较对照组低20%-25%);昆明小鼠组自主活动次数减少40%-45%、转棒实验掉落时间缩短35%-40%、关节蜷缩时间增加50%-55%、摄食量减少15%-20%;

　　②血清学指标：SD大鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β)升高2.5-3.0倍、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)升高2.2-2.6倍、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)升高2.0-2.4倍、透明质酸(HA)降低35%-40%;昆明小鼠血清IL-1β升高2.0-2.4倍、TNF-α升高1.8-2.2倍、MMP-3升高1.9-2.3倍、HA降低30%-35%;

　　③病理形态学：SD大鼠膝关节软骨表面粗糙缺损(缺损面积达40%-45%)、软骨细胞数量减少50%-55%、滑膜增生增厚2.0-2.5倍、关节腔积液;昆明小鼠膝关节软骨变薄(厚度减少30%-35%)、表面纤维化率达70%以上、滑膜轻度充血及炎症细胞浸润;

　　④组织指标：SD大鼠膝关节软骨组织Ⅱ型胶原α1链(COL2A1)mRNA表达降低2.3倍、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)mRNA表达降低2.1倍、MMP-13 mRNA表达升高2.5倍;昆明小鼠软骨COL2A1 mRNA降低1.9倍、Aggrecan mRNA降低1.7倍、MMP-13 mRNA升高2.2倍;

　　⑤功能指标：SD大鼠膝关节活动度降低35%-40%、压痛阈值降低40%-45%、步态周期延长30%-35%;昆明小鼠膝关节屈伸范围减少30%-35%、被动活动阻力增加45%-50%、转棒实验停留时间缩短40%-45%;