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哮喘模型

  实验动物:SD大鼠、昆明小鼠

  模型构建方法:

  ①SD大鼠哮喘模型:采用卵清蛋白(OVA)致敏-激发法。第1天腹腔注射OVA致敏液(含OVA 100μg+氢氧化铝佐剂2mg),第7天重复致敏1次;第14天起每日置于雾化箱中,用2%OVA溶液雾化激发30分钟,连续7天;期间自由摄食饮水,每日观察呼吸状态及抓挠行为。

  ②昆明小鼠哮喘模型:采用OVA致敏-激发法。第1天腹腔注射OVA致敏液(含OVA 50μg+氢氧化铝佐剂1mg),第8天重复致敏1次;第15天起每日用1.5%OVA溶液雾化激发20分钟,连续6天;期间自由摄食饮水,每日监测体重及呼吸频率变化。

  成模周期:SD大鼠19-21天/昆明小鼠17-19天

  评价指标:

  ①行为学指标:SD大鼠组出现明显喘息(呼吸频率增加45%-50%)、抓挠鼻部频次增加60%-65%、活动量显著减少(旷场实验总路程减少55%-60%)、摄食量下降30%-35%、毛发蓬松无光泽;昆明小鼠组呼吸急促(呼吸深度增加50%-55%)、竖毛明显(竖毛率达80%以上)、攀爬能力下降(网格攀爬时间延长40%-45%)、自主活动次数减少45%-50%、体重增长缓慢(较对照组低25%-30%);

  ②血清学指标:SD大鼠血清OVA特异性IgE升高2.8-3.2倍、白介素-4(IL-4)升高65%-70%、白介素-5(IL-5)升高60%-65%、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)升高55%-60%、嗜酸性粒细胞计数升高50%-55%;昆明小鼠血清OVA特异性IgE升高2.5-2.9倍、IL-4升高60%-65%、IL-5升高55%-60%、TNF-α升高50%-55%、嗜酸性粒细胞计数升高45%-50%;

  ③病理形态学:SD大鼠肺组织支气管黏膜上皮损伤、杯状细胞增生、黏液分泌增多、支气管平滑肌增厚、嗜酸性粒细胞浸润;昆明小鼠肺组织肺泡间隔增厚、支气管周围炎症细胞聚集、小气道黏液阻塞、肺间质水肿、嗜酸性粒细胞浸润;

  ④组织指标:SD大鼠肺组织IL-4 mRNA表达升高3.1倍、IL-5 mRNA表达升高2.8倍、TNF-α mRNA表达升高2.5倍;昆明小鼠肺组织IL-4 mRNA表达升高2.9倍、IL-5 mRNA表达升高2.6倍、TNF-α mRNA表达升高2.3倍;

  ⑤功能指标:SD大鼠气道阻力增加65%-70%、潮气量减少45%-50%、肺顺应性降低40%-45%、体力耐力下降(游泳时间缩短55%-60%)、24小时尿量减少30%-35%;昆明小鼠气道阻力增加60%-65%、潮气量减少40%-45%、肺顺应性降低35%-40%、被动回避实验错误次数增加45%-50%、小肠推进率降低30%-35%;

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