全身毒性试验

　　实验动物：SPF级SD大鼠(体重180-220g)、SPF级新西兰兔(体重2.0-2.5kg)，雌雄各半，适应性喂养1周后开展实验，饲养环境符合国家标准(温度22-25℃、湿度50%-60%、12h光暗循环)。实验前12h禁食不禁水，实验前经临床检查确认动物无明显器质性疾病、精神状态良好。

　　模型构建方法：参照GB/T 16886.11《医疗器械生物学评价 第11部分：全身毒性试验》执行，采用急性全身毒性试验(静脉注射法+经口灌胃法)。①SD大鼠静脉注射模型：将动物随机分为实验组、阴性对照组(生理盐水)、阳性对照组(10%乙醇溶液)，每组10只。医疗器械浸提液按GB/T 16886.5标准制备(生理盐水为介质，1cm²/mL表面积比，37℃孵育24h，0.22μm滤膜除菌)，按10mL/kg体重经尾静脉注射;②新西兰兔经口灌胃模型：随机分组同大鼠，每组6只，浸提液按20mL/kg体重经口灌胃。注射/灌胃后单笼饲养，自由饮食饮水。

　　成模周期：急性全身毒性试验连续观察14天，分别在给药后1h、24h、48h、72h进行详细临床观察，之后每日观察1次直至实验结束。

　　评价指标：①一般状况指标：每日记录动物体重变化、饮食量、饮水量及活动状态;②临床症状指标：观察是否出现呕吐、腹泻、抽搐、毛发竖立、精神萎靡等毒性反应，记录出现时间及持续时长;③病理形态学指标：实验结束后处死动物，取心、肝、脾、肺、肾等主要脏器，甲醛固定后HE染色，观察组织细胞变性、坏死、炎症浸润等情况;④血清学指标：采集动物血清，检测肝功能(ALT、AST、ALP)、肾功能(BUN、Cr)、电解质(K+、Na+、Cl-)及炎症因子(IL-6、TNF-α、IL-1β)水平;⑤分子指标：实时荧光定量PCR检测肝组织CYP3A4、CYP2E1 mRNA表达，Western blot检测肾组织NGAL、KIM-1蛋白表达;⑥功能指标：测定肝糖原含量评估肝脏代谢功能，计算肌酐清除率评估肾功能。

　　图片：需补充动物体重变化折线图、主要脏器HE染色显微图、血清肝肾功能指标柱状图、炎症因子水平雷达图等。