黑色素瘤模型

　　实验动物：C57BL/6小鼠、裸鼠、SD大鼠、新西兰兔、恒河猴

　　模型构建方法：原位移植法(C57BL/6小鼠麻醉后暴露背部真皮层，注射1×10⁶个B16-F10黑色素瘤细胞至皮下组织)/皮下移植法(裸鼠背部皮下注射2×10⁶个A375人黑色素瘤细胞)/化学诱导法(SD大鼠背部皮肤涂抹0.5%二甲基苯蒽(DMBA)溶液，每周1次，连续4周，随后每周涂抹12-O-十四酰佛波醇-13-乙酸酯(TPA)溶液2次，连续12周)/基因工程模型(BRAF V600E突变转基因小鼠，自发形成皮肤黑色素瘤)

　　成模周期：2-3周(原位移植法)/1-2周(皮下移植法)/12-16周(化学诱导法)/6-12个月(基因工程模型)

　　评价指标：

　　①行为学指标：模型组出现体重较对照组下降20%-25%，活动量显著减少，局部皮肤出现黑色或褐色肿块，抓挠次数增加(每日>10次)，旷场实验总活动距离减少30%-40%;

　　②血清学指标：血清S100B蛋白水平升高3-5倍，乳酸脱氢酶(LDH)活性升高2-3倍，肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)浓度升高2-3倍，血管内皮生长因子(VEGF)水平显著升高;

　　③病理形态学：HE染色可见肿瘤细胞呈巢状或弥漫性生长，胞质含黑色素颗粒，核大深染、核分裂象增多;免疫组化显示S100阳性率>80%、HMB45阳性率>70%、Ki67阳性率>70%;皮肤镜检查可见色素不均匀、边界不规则的肿块;Micro-CT扫描可见肺部或肝脏转移灶;

　　④组织指标：肿瘤体积随成模时间增大(原位移植3周后可达150-200mm³)，黑色素瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)表达升高，抑癌基因p53表达降低，基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA表达升高2.5倍;

　　⑤功能指标：皮肤屏障功能受损(经皮水分流失增加40%-50%)，转移模型中肺部、肝脏HE染色可见黑色素瘤转移灶;