骨癌模型

　　实验动物：C57BL/6小鼠、裸鼠、SD大鼠、新西兰兔、恒河猴

　　模型构建方法：原位移植法(C57BL/6小鼠麻醉后暴露股骨远端，注射1×10⁶个K7M2骨肉瘤细胞系至骨髓腔内)/皮下移植法(裸鼠背部皮下注射2×10⁶个MG63人骨肉瘤细胞)/化学诱导法(SD大鼠每周腹腔注射0.1mL/kg甲基胆蒽(MCA)溶液，连续8周)/基因工程模型(CRISPR/Cas9敲除p53、Rb基因构建转基因小鼠，自发形成骨肉瘤)

　　成模周期：2-3周(原位移植法)/1-2周(皮下移植法)/8-12周(化学诱导法)/6-12个月(基因工程模型)

　　评价指标：

　　①行为学指标：模型组出现患肢疼痛(缩足反射阈值降低30%-40%)、活动受限，步态异常(患肢支撑时间缩短、步幅减小)，爬梯实验中患肢负重比例下降20%-30%，体重增长缓慢或下降;

　　②血清学指标：血清碱性磷酸酶(ALP)活性升高2-3倍，骨钙素(OC)水平升高1.5-2倍，肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)浓度增加2-3倍，基质金属蛋白酶-9(MMP-9)活性显著升高;

　　③病理形态学：HE染色可见骨组织中肿瘤细胞弥漫性浸润，破坏骨小梁结构，核大深染、核分裂象增多;免疫组化显示Ki67阳性率>60%，osteopontin(骨桥蛋白)阳性表达增强;Micro-CT扫描可见骨质破坏、骨皮质缺损，肿瘤区域骨密度降低;

　　④组织指标：肿瘤体积随成模时间增大(原位移植3周后可达100-150mm³)，骨肿瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)表达升高，抑癌基因p53表达降低，RANKL(核因子κB受体活化因子配体)mRNA表达升高2倍;

　　⑤功能指标：生物力学测试显示患肢骨最大抗压强度下降40%-50%，X线片可见骨质破坏区及软组织肿块，转移模型中肺部HE染色可见转移灶形成;