寒证

　　实验动物：SD大鼠、C57BL/6小鼠、Wistar大鼠、KM小鼠

　　模型构建方法：

　　①实寒证模型(外感寒邪型)：SD大鼠置于低温(0-2℃)、风速3m/s的环境中，每日暴露8小时，连续4天;

　　②虚寒证模型(脾肾阳虚型)：C57BL/6小鼠每日灌胃0.3mL/10g冰水，同时皮下注射氢化可的松0.3mg/kg，连续8天;

　　③寒凝气滞证模型：Wistar大鼠腹腔注射肾上腺素0.15mg/kg，每日1次，连续3天，同时置于4℃环境4小时/天;

　　成模周期：实寒证4-6天/虚寒证8-10天/寒凝气滞证3-5天

　　评价指标：

　　①行为学指标：实寒证组恶寒战栗、蜷缩不动，体温降低0.8-1.2℃，流涕清稀，活动量减少50%-60%;虚寒证组畏寒肢冷、精神倦怠，大便溏薄(每日3-4次)，毛色枯槁，体重下降10%-15%;寒凝气滞证组肢体拘挛、局部疼痛(对按压反应敏感)，口唇青紫，活动迟缓;

　　②血清学指标：实寒证血清TNF-α、IL-1β升高1.5-2倍;虚寒证血清甲状腺素(T3、T4)降低25%-30%，皮质醇降低20%-25%;寒凝气滞证血清D-二聚体升高1.5-2倍，血管紧张素Ⅱ升高2倍;

　　③病理形态学：实寒证鼻腔黏膜充血水肿、分泌物清稀，肺组织轻度间质水肿;虚寒证脾组织细胞萎缩、脂肪浸润，肾组织肾小管上皮细胞变性;寒凝气滞证血管壁增厚、管腔狭窄，局部组织缺血性改变;

　　④组织指标：实寒证肺组织TLR4 mRNA表达升高1.5倍;虚寒证脾组织ATP酶活性降低35%-40%，肾组织SOD活性降低25%-30%;寒凝气滞证血管组织ET-1 mRNA表达升高2.5倍;

　　⑤功能指标：实寒证大鼠耐寒能力显著降低(低温环境存活时间缩短40%-50%);虚寒证胃肠蠕动减慢60%以上，尿量增多20%-30%;寒凝气滞证尾部血流速度减慢30%-40%(激光多普勒检测)，局部皮肤温度降低1.5-2℃;